血清脂蛋白和血清脂蛋白电泳

脂蛋白电泳主要用于高脂蛋白血症分型，也有助于了解冠心病的血脂状态，更好地指导临床诊疗工作。

基本信息：

专科分类：心血管检查分类：生化检查

适用性别：男女均适用是否空腹：空腹

参考价格：20-30元

正常值：

醋酸纤维薄膜电泳法

乳糜微粒0g/L(0mg/dl)；

极低密度脂蛋白0.06～0.3g/L(6～30mg/dl)；

低密度脂蛋白<7g/L(<700mg/dl)；

高密度脂蛋白：

男0.52±0.11g/L(43±18mg/dl)；

女0.55±0.13g/L(47±2mg/dl)。

临床意义：

1、增高：见于原发性高脂血症。

2、降低：见于低脂蛋白血症。

注意事项：

静脉采血后立即送检，检测操作：

1、将缓冲液加入电泳槽内，调节两侧槽内的缓冲液，使其处于同一平面。

2、醋酸纤维素薄膜的准备：取醋酸纤维素薄膜(2cm×8cm)在毛面的一端(负极侧)1.5cm处用铅笔轻划一横线，做点样标记。编号，并标明正、负极后，将薄膜置于巴比妥-巴比妥钠缓冲液中浸泡，待充分浸透后(一般为20min)取出，夹于洁净滤纸中间吸去多余的缓冲液。

3、将醋酸纤维素薄膜毛面向上贴于电泳槽支架上拉直。用微量吸管吸取无溶血血清3～5μl于横线处沿横线加样，样品应与薄膜的边缘保持一定的距离，以免电泳图谱中的蛋白区带变形，待血清渗入薄膜后，反转薄膜，使光面朝上，平直地贴于电泳槽支架上，用双层滤纸或四层纱布将薄膜的两端与缓冲液连通，稍待片刻。

4、接通电源，注意醋酸纤维素薄膜上的正、负极，切勿接错。电压90～150V，电流0.4～0.6mA/cm(不同的电泳仪所需电压，电流可能不同，应灵活掌握)，夏季通电45min，冬季通电时间稍长，约为60min，电泳区带展开约25～35mm即可。

5、染色：通电完毕，取下薄膜直接浸于丽春红S染液或氨基黑10B染色液中，染色5～10min(以白蛋白区带染透为止)，然后在漂洗液中漂去剩余染料，直至背景无色为止。

6、定量：

① 比色法：将漂洗的薄膜吸干，剪下各染色的蛋白区带入相应的试管中，在白蛋白管中加0.4mol/L氢氧化钠6ml(计算时吸光度乘以2)，其余各管加 3ml，振摇数次，置37℃水箱20min使其色泽浸出。氨基黑10B染色用分光光度计在620nm处读取各管吸光度，然后计算出各管的含量(同时做空白管对照)。

丽春红S染色时浸出液用0.1mol/L氢氧化钠，加入量同上法。10min后，白蛋白管内加400ml/L醋酸 0.6ml(计算吸光度时乘以2)，其余各管加0.3ml，以中和部分氢氧化钠，使色泽加深，必要时离心，取上清液用分光光度计在520nm处读取各管的吸光度(同时作空白对照)，然后计算各自的含量。

②光密度计扫描法：A.透明：吸去薄膜上的漂洗液(为防止透明液被稀释影响透明结果)，将薄膜浸入透明液中2～3min，然后取出，以滚动的方式平贴于洁净无划痕的载物玻璃片上(切勿产生气泡)，将此玻片竖立片刻，除去多余透明液后，置于恒温 90～100℃的烘箱内，烘烤10～15min，取出冷却至室温，用此法透明的各蛋白区带鲜明，薄膜平整，可供直接扫描和永久保存(用氢萘或液体石蜡透明，应将漂洗过的薄膜烘干后进行透明，此法透明的薄膜不能存久，且易发生皱折)。②扫描定量：将已透明的薄膜放入全自动光密度计或其他光密度计暗箱内，进行扫描分析。

检查过程：

1、样本：可用新鲜、未冷冻的血清分离脂蛋白。血浆不适合用来做脂蛋白电泳，因为会出现一条纤维蛋白原区带。

2、带有清晰的分离组分的脂蛋白图形是进行准确解释的先决条件。如果能够很好地满足这些条件，在脂蛋白电泳和参考方法(超速离心法)之间就可以相当一致。各组分的精密度不同，用变异系数表示，估计一般都在5%以下。

3、偶尔α-脂蛋白会消失和(或)出现一条舌状的窄的α-脂蛋白区带。这是因为游离脂肪酸在。α-脂蛋白上积聚，造成了这些微粒带有电荷相等。由于α-区带密度增大，从而导致结果偏高。和沉淀技术相比，定量脂蛋白电泳的耗资较高。

不适宜人群：

不合宜人群： 一般无不适合的人群。

不良反应与风险：

1、局部皮下出血：采血后应按压时间充分，尤其是有出血倾向者，以免因没有凝血造成皮下渗血和淤青。

2、感染：静脉采血时注意无菌操作，以免造成局部感染。