单纯疱疹病毒感染：用于生殖器疱疹病毒感染初发和复发病例，对反复发作病例口服本品用作预防。
带状疱疹：服用于免疫功能正常者带状疱疹和免疫缺陷者轻症病例的治疗。
免疫缺陷者水痘的治疗。
口服
生殖器疱疹初治和免疫缺陷者皮肤粘膜单纯疱疹：成人常用量一次0.2g（2片），一日5次，共10日；或一次0.4g（4片），一日3次，共5日；复发性感染，一次0.2g（2片），一日5次，共5日；复发性感染的慢性抑制疗法，一次0.2g（2片），一日3次，共6个月，必要时剂量可加至一日5次，一次0.2g（2片），共6～12个月。
带状疱疹：成人常用量一次0.8g（8片），一日5次，共7～10日。
肾功能不全的成人患者应按下表调整剂量；
肌酐清除率（ml/分钟）（ml/秒） 剂量（g） 给药间隔（小时）
生殖器疱疹
起始或间歇疗法
＞10（0.17） 0.2 4（一日5次）
0～10（0～0.17） 0.2 12
慢性抑制疗法
＞10（0.17） 0.4 12<
0～10（0～0.17） 0.2 12
带状疱疹
＞25（0.42） 0.8 4（一日5次）
10～25（0.17～0.42） 0.8 8
0～10（0～0.17） 0.8 12
水痘： 2岁以上儿童按体重一次20mg/kg，一日4次，共5日，出现症状立即开始治疗。40kg以上儿童和成人常用量为一次0.8g（8片），一日4次，共5日。
对更昔洛韦过敏者也可能对本品过敏。
急性或慢性肾功能不全者不宜用本品静脉滴注，因为滴速过快时可引起肾功能衰竭。
以下情况需考虑用药利弊：脱水患者，本品剂量应减少。严重肝功能不全者、对本品不能承受者、精神异常或以往对细胞毒性药物出现精神反应者，应用本品易产生精神症状，需慎用。
严重免疫功能缺陷者长期或多次应用本品治疗后可能引起单纯疱疹病毒和带状疱疹病毒对本品耐药。如单纯疱疹患者应用阿昔洛韦后皮损不见改善者应测试单纯疱疹病毒对本品的敏感性。
对诊断的干扰：可引起肾小管阻塞，使血肌酐和尿素氮增高。如剂量恰当、水分充足一般不会引起。
随访检查：由于生殖器疱疹患者大多易患子宫颈癌，因此患者至少应一年检查一次，以早期发现。静脉用药可能引起肾毒性，用药前或用药期间应检查肾功能。
静脉滴注后2小时，尿药浓度最高，此时应给病人充足的水，防止药物沉积于肾小管内。
静脉滴注时宜缓慢，否则可发生肾小管内药物结晶沉淀，引起肾功能损害的病例可达10%，并勿使之漏，至血管外，以免引起疼痛及静脉炎。
肥胖患者的剂量应按标准体重计算。
本品对单纯疱疹病毒的潜伏感染和复发无明显效果，不能根除病毒。
与齐多夫定（Zidovudine）合用可引起肾毒性，表现为深度昏睡和疲劳。
与丙磺舒竞争性抑制有机酸分泌，合并用丙磺舒可使本品的排泄减慢，半衰期延长，体内药物量蓄积。
本品对病毒有特殊的亲和力，但对哺乳动物宿主细胞毒性低。体外细胞转化测定有致癌报道，但动物实验未见致癌依据。某些动物实验显示高浓度药物可致突变，但无染色体改变的依据。
本品的致癌与致突变作用尚不明确。大剂量注射可致动物睾丸萎缩和精子数减少，药物能通过胎盘，动物实验证实对胚胎无影响。