系统性红斑狼疮患者血清可溶性Fas检测

2015-09-30 17:22:59

系统性红斑狼疮患者血清可溶性fas检测

中华皮肤科杂志 1999年第1期第32卷短篇论著

作者：张忠奎　吴先林　何云志

单位：张忠奎(610083 成都，成都军区总医院皮肤科)；吴先林　何云志(第三军医大学新桥医院皮肤科)

　　系统性红斑狼疮(sle)是自身免疫性疾病的重要代表，众多的研究表明^{^[1～6]}，sle的发生、发展及其免疫学改变与自身反应性t淋巴细胞或b淋巴细胞的细胞凋亡缺陷有关，狼疮患者血清中可溶性fas(sfas)水平明显升高^{^[3]}。因此，我们测定了63例sle患者血清的sfas水平，并对其意义作了初步讨论。

　　一、材料与方法

　　1.63例sle患者，符合美国风湿病协会1982年修订的sle分类标准。女59例，男4例，平均年龄32岁，平均病程3.36年。其中活动期患者37例，缓解期患者26例。健康献血员20例，男5例，女15例，平均年龄28岁，作为正常人对照。

　　2.主要试剂：fas单克隆抗体(dako公司产品)。

　　3.血清标本：外周静脉血3ml，留取血清－20℃保存备用。

　　4.间接elisa法测定血清sfas：1抗用兔抗人fas单抗igg，空白对照用底物溶液代替1抗。用邻苯二胺显色后，加入终止液，用空白孔校正零点，于490nm测吸光度值(a值)。

　　5.各均数间比较用t检验。

　　二、结果

　　sle患者血清sfas a值为0.367±0.097(x±s)，与正常人对照组(0.19±0.033)比较有显著性差异(t=7.965,p＜0.01)；缓解期血清sfas为0.276±0.035，与正常人对照组比较具显著性差异(t=7.135,p＜0.01)；活动期患者血清sfas为0.432±0.072，明显高于正常人对照组(t=14.146,p＜0.01)及缓解期患者(t=7.654,p＜ 0.01)。

　　三、讨论

　　fas有膜fas(mfas)和sfas两种形式。fas系细胞表面的跨膜蛋白质分子，是介导凋亡的细胞表面受体。许多组织及细胞均有一定量的fas表达，为便于与sfas相区别，称之为mfas。sfas是mfas的可溶性形式，由于一个编码mfas跨膜区的dna外显子缺失突变造成mrna改变，因而翻译出缺少跨膜区的sfas。sfas可抑制mfas介导的凋亡，改变了淋巴细胞的发育成熟过程，增加了淋巴细胞对自身抗原的反应性增殖，而且发现sle患者血清sfas水平增高^{^[3]}。cheng等^{^[3]}报道在60％(6/10)的sle患者血清中sfas水平升高，我们发现，sfas在sle患者血清中明显升高，与正常人对照组相比有显著性意义，sle活动期sfas水平明显高于缓解期和正常人对照组，缓解期sfas水平虽明显低于活动期，但显著高于正常人对照组。表明活动期淋巴细胞凋亡程度明显低于缓解期和正常人对照组，而对自身抗原的反应性增殖程度明显高于缓解期和正常人对照组；缓解期仍有部分淋巴细胞处于活化增殖状态，凋亡程度降低。结合我们的实验结果，可看出sle患者，sfas在增殖刺激后表达增加，进而导致自身反应性细胞能持续性启动或扩增自身免疫性疾病。

　　参　考　文　献

　　[1] tsubata t, wu j， honjo t, et al. b cell apoptosis induced by antigen receptor cross-linking is blocked by a t-cell signal through cd40. nature, 1993,364:645-648.

　　[2] watanabe-fukunaga r, brannan ci, copeland ng, et al. lymphoproliferation disorder in mice explained by defects in fas antigen that mediates apoptosis. nature, 1992,356:314-317.

　　[3] cheng j, zhou t, liu c, et al. protection from fas-mediated apoptosis by a soluble form of the fas molecule. science, 1994,263:1759-1761.

　　[4] mysler e, bini p, drappa j, et al. the apoptosis-1/fas protein in human systemic lupus erythematosus. j clin invest, 1994,93:1029-1034.

　　[5] amasaki y, kobayashi s, takeda t, et al. up regulated expression of fas antigen (cd95) byperipheral naive and memory t cell subsets in patients with systemic lupus erythematosus: a possible mechanism for lymphopenia. clin exp immunol, 1995,99:245-250.

　　[6] ohsako s, hara m, harigai m, et al. expression and function of fas antigen and bcl-2 in human systemic lupus erythematosus lymphocytes. clin immunol immunolpathol, 1994,73:109-114.

(收稿：1998－06－01　　修回：1998－10－06)