系统性红斑狼疮患者白介素8和肿瘤坏死因子α水平的检测

2015-09-30 17:23:03

　　中华皮肤科杂志 1999年第1期第32卷短篇论著

　　作者：吴秀忠　王应俊　于天周

　　单位：吴秀忠　王应俊　于天周（266300 山东省胶州市解放军第一三五医院皮肤科）

　　我们应用酶联免疫吸附法(elisa法)检测了系统性红斑狼疮(sle)患者血清中的白介素8(il-8)及肿瘤坏死因子α(tnfα)含量，同时采用免疫组化技术对患者皮损和非皮损区的il-8进行了观察。现将结果报道如下。

　　一、资料和方法

　　(一)病例选择： sle患者55例，均符合美国风湿病协会1982年诊断标准。活动期与稳定期sle的判断参照陈家福等[1]采用的标准。其中活动期sle患者32例，男4例，女28例；年龄16～55岁(30.18±13.79岁)。稳定期sle患者23例，均为有活动病史，治疗后病情稳定的患者(泼尼松40～80mg/d，治疗4周至16个月，症状大多消失)，男2例，女21例；年龄18～54岁(33.16±12.79岁)。采静脉血，取分离后的血清，置－23℃待检。对其中12例患者(活动期、稳定期各6例)取不同部位皮损和非皮损处皮损，10％甲醛液固定，石蜡包埋，常规切片厚5μm。对照组血清取自30例正常人，男5例，女25例；年龄20～52岁(31.27±16.32岁)。外科手术的正常皮肤10份。

　　(二)方法：①双抗体夹心elisa法：il-8试剂盒购自军事医学科学院北京邦定医学生物公司。tnfα试剂盒购自解放军总医院东亚免疫技术研究所。实验严格按试剂盒说明书进行。待检血清－23℃冰箱冻存，同批测定。②免疫组化法：切片常规脱蜡、水化；甲醇-h2o2液封闭内源性过氧化酶。滴加兔抗il-8单抗，湿盒内室温1h；pbs冲洗3次，每次5min；滴加猪抗兔酶标抗体，湿盒内室温30min；dab显色，苏木素复染，脱水透明，中性树胶封片，光镜观察。

　　(三)统计学处理：实验数据以±s表示，采用两样本均数的t检验进行统计学分析。

　　二、结果

　　(一)il-8、tnfα检测结果见表1。

　　表1　sle患者与正常人血清il-8及tnfα含量

　　组别例数il-8（ng/ml）tnfα（ng/ml）

　　±st值p值±st值p值

　　对照组305.66±2.864.85〈0.0118.4±4.85.89〈0.01

　　sle患者组5510.78±5.3726.7±6.9

　　活动期3212.20±5.822.48〈0.0529.3±5.24.93〈0.01

　　稳定期238.74±3.8922.5±4.9

　　(二)免疫组化法显示sle皮损处il-8染色强度高于非皮损处皮肤和正常人皮肤，主要分布在表皮的基底层；活动期患者皮损处的染色强度高于稳定期。

　　三、讨论

　　本研究发现活动期sle患者il-8水平明显升高，经治疗病情稳定后，il-8水平降低，活动期与稳定期比较，也有显著性差异。此结果与holcombe等[2]的报道一致。

　　tnfα主要由单核巨噬细胞合成和分泌，参与自身免疫的炎症过程，是介导自身免疫反应的重要效应因子[3]。我们的研究发现，在活动期患者中tnfα水平明显升高，经治疗病情稳定后tnfα水平降低，此结果与prokop′ev等[4]报道一致。yap等[5]研究了tnfα在sle发生中的作用，细胞表面主要组织相容性复合体(mhc)抗原表达是它与激活的t淋巴细胞相互反应的先决条件，而sle患者血清能够选择性地上调培养的人脐静脉内皮细胞上mhc-ⅰ类抗原表达，而不诱导mhc-ⅱ类抗原表达，且其刺激指数明显高于正常人血清或其它病患者血清。活动期sle患者的平均刺激指数高于非活动期患者。

　　参　考　文　献

　　[1] 陈家福, 殷志伟, 冯树一, 等. sle患者白细胞介素6活性的研究. 中华皮肤科杂志, 1993,26:32-34.

　　[2] holcombe rf, beathge ba, wolf re, et al. correlation of serum interleukin-8 and cell surface lysosome-associated membrane protein expression with clinical disease activity in systemic lupus erythematosus. lupus, 1994,3:97-106.

　　[3] jacob co. studies on the role of tumor necrosis factor in murine and human autoimmunity. j autoimmun, 1992,5 suppl a:133-143.

　　[4] prokop′ev aa, alekseeva tg, zimina zv, et al. the level of the tumor necrosis factor in the blood serum of patients with systemic lupus erythematosus and rheumatoid arthritis. ter arkh, 1993,65:9-12.

　　[5] yap hk, ng sc, lee bw, et al. modulation mhc expression on human endothelial cells by sera from patients with systemic lupus erythematosus. clin immunol immunopathol, 1993,68:321-326.

　　(收稿：1998－04－06　　修回：1998－08－10)