系统性红斑狼疮患者临床免疫指标分析
中华皮肤科杂志 1998年第5期第31卷 论著摘要
作者：邓安梅 仲人前 张玲珍 屠小卿 孔宪涛
单位：200003 上海第二军医大学长征医院全军临 床免疫中心
系统性红斑狼疮(sle)是常见的多系统损害自身免疫性结缔组织病，其病因 和发病机理尚未完全阐明，可能与免疫系统调节功能紊乱有关。我们采用流式细胞技术和酶 联检测技术，分析sle患者细胞免疫和体液免疫功能，并探讨临床免疫指标在发病机理中的意义。
一、临床资料
研究对象：按美国风湿病学会1982年制定的sle诊断标准确诊的sle患者40例，平均年龄38岁 ，均为女性。正常对照组40例，取自健康献血员，均为女性，平均年龄32岁。
二、实验方法
(一)细胞免疫指标测定：于反应管中加入fitc标记的抗cd2、cd3、cd4、cd8、cd16、cd19、 cd45ra和cd29抗体，再加入 全血100μl，于漩涡振荡器上混匀，室温下孵育20分钟，在immu no-proper仪上进行红细胞处理，标本在8小时内上流式细胞仪检测完毕。每一标本设阴性 对照。
(二)体液免疫指标测定：取血后6小时内留取血清分装冻存于-20℃备用，血清避免反复冻融 。冻干马抗人igg、iga、igm、c3、c4血清复溶后用40g/l peg6000稀释液按标定效价稀释， 放置30分钟后用0.45μm滤膜抽滤，滤过液备用，生理盐水(用0.45μm滤膜抽滤)、未冻干 的定值标准血清和患者血清用酶联检测仪经免疫比浊法测c3、c4，散射速率比 浊法测 igg、iga、igm［1］。
(三)统计学方法：实验数据以±s表示，采用t检验进行统计分析。
三、结果
(一)sle患者与对照组相比，sle患者cd2+、cd8+、cd19+、cd29+、cd16+(nk)、c d44+细胞及血清中igg、iga均显 著增加(p＜0.01)，cd3+、cd4+、c d45ra+和t细胞表面tcr含量及血清c3、c4均明显降低(p＜0.01)，cd4 +/cd8+倒置(p＜0.01)。sle患者血清igg、iga、igm显著增高( p＜0.01)，而c3、c4下降(p＜0.01)。见表1和表2。
表1 sle患者免疫细胞表面标志分析(单位：%)
表面标志例数cd2 +cd3+cd4+cd8+cd4+/cd8+
正常人4077.46±6.2765.86±4.6037.53±4.9128.01 ±3.131.25±0.41
sle4087.31±5.4259.22±5.5726.22±3.7536.88± 4.230.72±0.25
t值-7.5175.81311.5788.4476.979
p值-＜0.01＜0.01＜0.01＜0.01＜0.01
表面标志例数cd16+ (nk)tcrcd19+cd44+cd45ra+cd29+
正常人405.31±1.3270.14±5.2312.20±2.5134 .93±3.0445.43±5.2131.31±3.64
sle408.25±1.4527.52±3.3419.71±2.2458.55±4 .5224.32±4.2645.42±4.71
t值-9.48343.43714.11927.42419.83813.397
p值-＜0.01＜0.01＜0.01＜0.01＜0.01＜0. 01
表2 sle患者体液免疫指标分析
指标例数igg(g/l)igm(mg/l)iga(mg/l)c3(mg/l)c4(mg/l)
正常人4013.27±3.281180±4301450±2701470±2306 50±210
sle4024.93±4.092220±5602780±410930±310290 ±90
t值-14.0669.31617.13412.7709.965
p值-＜0.01＜0.01＜0.01＜0.01＜0.01
(二)ana(+)组(18例)与ana(-)组(22例)比较表明，ana(+)组体液免疫状态较为亢进(p＜0.05)，细胞免疫状态无显著性差异(p＞0.05)。
(三)3例活动期sle患者经临床治疗后，症状、体征好转，其临床免疫指标如cd4+、cd8+ 、igg也趋向正常(p＞0.05)。
四、讨论
本研究结果表明，sle患者 外周血淋巴细胞cd2的水平较正常人明显升高(p＜0.01)，与张泽松［2］等报道的自身免疫病患者t细胞cd2 mrna水平明显增高一致。cd3 是成熟t淋巴细胞标志，它与t细胞抗原受体tcr特异性结合形成tcr/cd3复合物，在识别特异 性抗原和信号传递中起关键作用。本文结果显示，cd3和tcr在sle患者中明显低于正常(p＜0.01)。可能是由于患者体内t细胞功能失衡，正常成熟的t细胞消耗过多而 未能及时补偿所致。
cd4和cd8是成熟t细胞亚群的标志，分别与mhcⅱ类和ⅰ类抗原结合，不仅可增强t淋巴细胞 与抗原递呈细胞或靶细胞结合的程度，而且与刺激信号的传递有关。有人认为sle患者cd4 +/cd8+细胞比例失调，主要是由于cd4+细胞增多或cd8+细胞减少造成［ 3］，并因此认为是由于cd8+(ts)细胞减少和功能缺陷引起免疫功能亢进， 从而导致自身免疫损伤。而本文结果表明sle患者外周血cd8+细胞增多，而cd4+/cd8+ 细胞比值反而显著降低，甚至倒置。可能的解释是cd8+细胞数目虽然增多，但其功能发生 改变导致免疫失衡。
cd45ra+和cd29+可将cd4+t细胞分为不同的亚群，cd45ra+为抑制诱导t细胞，主要 功能是诱导t8+细胞发挥抑制功能，而cd29+是辅助诱导t细胞，主要功能是辅助b细胞产 生抗体［4，5］。cd45ra+是人幼稚t细胞标志，本文结果表明 ，sle患者cd45ra+减少(p＜0.01)，cd29+t细胞增多(p＜0.01)，可能与t8+细胞抑制亚群减少、辅助细胞与抑制细胞比例失调有关。本文 还发现，sle患者igg、iga、igm均增高(p＜0.01)，而c3、c4降低(p＜0.01)，反映了sle患者有体液免疫亢进，又有非特异性免疫功能紊乱，c3 、c4的降低可能是由于消耗太多所致。
ana(+)组与ana(-)组比较表明，ana(+)组体液免疫状态较为亢进(p＜0.05 )，细胞免疫状态无显著差异(p＞0.05)。3例活动期sle患者经临床治疗后 ，症状体征好转，其临床免疫指标也趋向正常。参考文献
1 金伯泉. 白细胞分化抗原. 见: 金伯泉主编. 细胞和分子免疫学 . 第1版. 西安: 世界图书出版社, 1995.1-32.
2 张泽松, 许成素, 刘士廉, 等. 自身免疫性疾病患者t细胞表面抗原cd2、cd4和cd 8 mrna的表达. 中国免疫学杂志, 1995,11∶303-306.
3 徐文玉. sle免疫调节功能紊乱的机理——t细胞亚群失衡和抗淋巴细胞抗体的作 用. 上海免疫学杂志, 1992,12∶253-256.
4 morimoto c, letvin nl, boyb aw, et al. the isolation and characterizati on of th e human helper inducer t cell subset. j immunol, 1985,134∶3762-3770.
5 morimoto c, letvin nl, distaso ja, et al. the isolation and charateriza tion of the human suppressor inducer t cell subset. j immunol, 1985,134∶1508-1515.
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