尖锐湿疣患者宫颈人巨细胞病毒和ⅱ型单纯疱疹病毒感染的检测
中华皮肤科杂志 1998年第3期第31卷 论著摘要
作者：宋文刚 欧知硕 刘桂秋 汪爱玲 李启巍
单位：271000 山东泰安，泰山医学院中心实验室 性病研究室(宋文刚 欧知硕 刘桂秋)，泰安市中心医院妇产科(汪爱玲 李启巍)
近几年来的研究已证实，宫颈癌的发生与人乳头瘤病毒(hpv)、人巨细胞病毒(hcmv)和ⅱ型单纯疱疹病毒(hsv-ⅱ)感染有关。为了解尖锐湿疣(ca)患者中hcmv和hsv-ⅱ感染的流行情况，探讨其性传播可能性，我们采用pcr技术对85例ca患者和156例一般孕妇进行宫颈hcmv和hsv-ⅱ感染的检测，并进行了比较观察，报道如下。
一、临床资料
1.实验组：85例女性ca患者为我院1994年5月至1996年5月性病门诊患者，临床诊断和病理诊断确诊为ca，年龄15～41岁，平均22.4±5.1岁；病程半个月至2年，平均2.8±2.5年。发病部位：大小阴唇、阴道口、宫颈及肛门周围处。患者本人或配偶有非婚性接触史81例(95.3%)，其中每月性伴数≥5个的ca患者31例，否认有非婚性接触史4例(4.7%)。选择hpv6b、hpv11型共用引物，采用pcr技术检测ca组织中hpv dna，hpv dna阳性79例(92.9%)，hpv dna阴性6例(7.1%)。既往性病史：有性病史者46例(54.1%)，其中3例有生殖器疱疹史，无性病史者39例(45.9%)。
2.对照组：156例来我室进行torch优生检测的一般孕妇，年龄23～35岁，平均26.5±3.1岁，既往无性病史和非婚性接触史。
二、实验方法
1.模板dna制备：用无菌棉拭子采集宫颈分泌物置于hanks液中，4℃ 16 000r/min，离心30分钟，弃上清，沉淀用1×pcr缓冲液(含0.45% np-40、0.45%吐温20、蛋白酶k 300mg/l)混匀，55℃水浴过夜，煮沸10分钟，冰浴后离心弃沉淀，上清用于pcr扩增模板。
2.寡核苷酸引物的设计：根据已公布的病毒基因组序列设计并合成寡核苷酸引物序列，hcmv引物序列为5′-tgggcatcgactgacgagca-3′、5′-tttagcagtctgcatagcct-3′，扩增片段为151个碱基对；hsv-ⅱ引物序列为5′-atggtgaacatcgacatgtacgg-3′、5′-cctccttgtcgaggccccgaaac-3′，扩增片段为391个碱基对。
3.pcr扩增反应和电泳检测：操作按作者前文［1］方法进行。
4.统计学处理：用χ2检验。
三、结果
1.实验组85例ca患者中26例hcmv dna阳性，阳性率为30.6%；9例hsv-ⅱ dna阳性，阳性率为10.6%；对照组156例一般孕妇中11例hcmv dna阳性，阳性率为7.1%；1例hsv-ⅱ dna阳性，阳性率为0.6%。
2.实验组中31例每月性伴数≥5个的ca患者，hcmv dna阳性率为51.6%(16/31)，hsv-ⅱ dna阳性率19.4%(6/31)；而其它ca患者hcmv dna阳性率18.5%(10/54)，hsv-ⅱ dna阳性率5.6%(3/54)。46例曾患过性病的ca患者，hcmv dna阳性率为45.7%(21/46)，hsv-ⅱ dna阳性率为15.2%(7/46)；而无性病史的ca患者hcmv dna阳性率为12.8%(5/39)，hsv-ⅱ dna阳性率为5.1%(2/39)。
四、讨论
在我们的调查中，ca患者宫颈hcmv感染率(30.6%)高于一般孕妇hcmv感染率(7.1%)，ca患者宫颈中hsv-ⅱ感染(10.6%)高于一般孕妇hsv-ⅱ感染率(0.6%)，ca患者与一般孕妇比较hsv-ⅱ、hcmv感染率有显著性差异(p＜0.01)。每月性伴数≥5个的ca患者较一般ca患者易患hcmv和hsv-ⅱ感染(p＜0.01)，既往有性病史的ca患者较无性病史者易患hcmv和hsv-ⅱ感染(p＜0.01)，提示性伴数和既往性病史是hcmv和hsv-ⅱ发病率增高的危险因素，非婚性接触是hcmv和hsv-ⅱ的重要传播途径。
参考文献
1 欧知硕, 宋文刚, 高丽英, 等. 聚合酶链反应检测人巨细胞病毒感染. 泰山医学院学报, 1994,15∶187-189.
山东省卫生厅青年基金资助课题
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