不同时期分离的淋病奈瑟菌药物敏感性测定
中华皮肤科杂志 1998年第3期第31卷 论著
作者：向辉 雍刚 叶梅君 李绍兴 周蓉 廖巫山 周启贵
单位：610041 成都，华西医科大学公共卫生学院［向辉(现在广州市天河区卫生防疫站) 叶梅君 周蓉)］；四川省皮肤病性病防治研究所(雍刚 李绍兴 廖巫山 周启贵)
关键词：淋病奈瑟菌；微生物敏感性试验
【摘要】目的 了解淋病奈瑟菌对抗生素敏感性的变迁情况。方法 对门诊1991年和1996年各100株标本进行了12种抗生素最小抑菌浓度(mic)测定。同时对产青霉素酶株(ppng)和非产青霉素酶株(non-ppng) 的mic值进行了比较。结果与结论 青霉素g、四环素等6种抗生素 mic值1 996年与1991年两者之间有显著性差异(p＜0.05或p＜0.01)。其中mic 50值变化较大的是青霉素g和氟哌酸，1996年比1991年均增加63倍。此外，ppng株和non -ppng株mic值也存在差异。
study on susceptibility of neisseria gonorrhoeae isolate d from chengdu in different periods xiang hui,yong gang ,ye meijun,et al. the college of public health, west china university of medi cal sciences, chengdu 610041
【abstract】 objective to study the changes of suscept ibi lities of neisseria gonorrhoeae to antibiotics in chengdu area.metho ds the mic values of 12 antibiotics to 100 strains in 1 991 and 100 strains in 1996 were determined, and the mic values to ppng and n on-ppng strains were also compared.results and conclusion the mic values of 6 antibiotics (including penici llin g, tetracycline,etc.) to the isolates in different periods changed sig nificantly (p＜0.05 or p＜0.01), and among them the values of mic50 of penicillin g and nor floxacin in 1996 had a 63-fold increase over those in 1991. moreover, there was a difference in mic values between ppng and non-ppng strains.
【key words】 neisseria gonorrhoeae microbial sensitivity t ests
近年来淋病奈瑟菌耐药菌株的大量出现，给淋病治疗带来了困难。因此，开展淋病奈瑟菌耐药性监测工作已是性病防治部门的一项重要工作。以往的监测工作大多是采用药敏纸片法。我们选用该地区常用于治疗淋病的12种抗生素，分别测定了每株菌的12种抗生素mic值。以便了解其mic值随时间的变化情况。现将研究结果报道如下。
材料和方法
(一)标本来源：标本取自四川省皮肤病性病防治研究所std门诊患者。取材方法按文献［1］进行。
(二)培养基：标本初代分离采用广西皮肤病研究所生产的桂敏培养基。标本复苏、增菌培养 及mic值测定均用英国oxiod公司生产的thayer-martin培养基。
(三)抗生素标准品：青霉素g为四川制药厂原料药，头孢三嗪购于瑞典roche药厂，壮观霉素 购于美国upjohn公司，其余抗生素标准品购于北京中国药品生物制品检定所。mic值测定质 控菌株a、b、c、d和e株由中国医学科学院皮肤病研究所馈赠。四川省科委和四川省卫生厅基金共同资助
表1 1991年、1996 年各100株淋病奈瑟菌
mic值测定统计分析
| 抗生素 | 年份 | mic(μg/ml) | 几何均数 |
p* |
||
| 范围 | mic50 | mic90 | ||||
| 青霉素 g | 19911996 | 0.0625～4
0.25～256 |
0.5
32 |
2
128 |
0.77 8.5 |
＜0.01 |
| 四环素 | 19911996 | 0.5～16
1～16 |
4
8 |
8
16 |
3.86
5.74 |
＜0.01 |
| 壮观霉素 | 1991
1996 |
8～32
8～32 |
32
16 |
32
32 |
26.69
17. 58 |
＜0.01 |
| 红霉素 | 1991
1996 |
0.0625～4
0.125～4 |
0.25
0.5 |
2
2 |
0 .49
0.69 |
0.05 |
| 乙酰螺旋霉素 | 1991
1996 |
2～64
1～64 |
16
16 |
32
32 |
12. 59
14.45 |
0.05 |
| 庆大霉素 | 1991
1996 |
4～32
4～32 |
8
8 |
16
16 |
11.48
9.74 |
0.05 |
| 卡那霉素 | 1991
1996 |
16～64
8～64 |
32
32 |
64
64 |
32.43
28 .35 |
＜0.01 |
| 新霉素 | 1991
1996 |
32～128
32～128 |
64
64 |
64
128 |
64.42
6 1.66 |
0.05 |
| 氯霉素 | 1991
1996 |
1～16
1～8 |
4
4 |
8
4 |
5.25
3.39 |
＜0 .01 |
| 头孢唑啉 | 1991
1996 |
0.5～16
0.125～16 |
2
2 |
8
4 |
2.19
1 .66 |
0.05 |
| 头孢三嗪 | 1991
1996 |
0.001～0.0625
0.001～0.125 |
0.004
0.00 8 |
0.0156
0.0312 |
0.0049
0.0069 |
0.05 |
| 氟哌酸 | 1991
1996 |
0.0156～1
0.125～64 |
0.0312
2 |
0.25
16 |
0.054
1.75 |
＜0.05 |
*各抗生素1991年与1996年比较，u检验
表2 1996年43株产青霉素酶株(ppng)和57株
非ppng的mic值比较
| 抗生素 | 菌株 | mic(μg/ml) |
几何均数 |
p值* | ||
| 范围 | mic50 | mic90 | ||||
| 青霉素 g | ppng非ppng | 8～256
0.25～8 |
128
1 |
256
4 |
93.11 1.36 |
＜0.01 |
| 四环素 | ppng非ppng | 1～16
1～16 |
8
4 |
16
16 |
7.03
4.91 |
＜0.01 |
| 壮观霉素 | ppng
非ppng |
8～32
8～32 |
16
16 |
32
32 |
17.95
17 .30 |
0.05 |
| 氟哌酸 | ppng
非ppng |
0.5～8
0.125～64 |
2
2 |
4
8 |
1.66
1 .83 |
0.05 |
| 红霉素 | ppng
非ppng |
0.25～4
0.125～4 |
0.5
0.5 |
2
2 |
0. 72
0.58 |
0.05 |
| 乙酰螺旋霉素 | ppng
非ppng |
2～64
1～64 |
16
16 |
32
32 |
17 .18
12.59 |
＜0.01 |
| 庆大霉素 | ppng
非ppng |
4～16
4～32 |
8
8 |
16
16 |
9.51
9.93 |
0.05 |
| 卡那霉素 | ppng
非ppng |
8～64
16～64 |
32
32 |
32
64 |
25.12
3 2.26 |
＜0.01 |
| 新霉素 | ppng
非ppng |
32～128
32～128 |
64
64 |
64
128 |
60.39
63.24 |
0.05 |
| 头孢唑啉 | ppng
非ppng |
0.25～16
0.125～8 |
1
2 |
4
4 |
1.39
1.89 |
＜0.05 |
| 氯霉素 | ppng
非ppng |
1～8
1～8 |
4
4 |
4
4 |
3.61
3.22 |
0.05 |
| 头孢三嗪 | ppng
非ppng |
0.001～0.125
0.001～0.125 |
0.004
0. 0156 |
0.0312
0.0312 |
0.0061
0.0077 |
0.05 |
*各抗生素ppng与非ppng比较，u检验
(四)含抗生素平皿的制作：具体制作方法按文献［2］进行。配制好 的平皿低温保存，一周内用完。
(五)标本mic值测定：方法按文献［2］进行。以细菌不生长的抗生素最高稀释度为淋病奈 瑟菌对该抗生素的mic值。
(六)β-内酰胺酶测定：方法按文献［2］进行。
结 果
(一)1991年、1996年淋病奈瑟菌的十二种抗生素mic值测定结果见表1。
(二)1991年100份标本β-内酰胺酶试验全部阴性。1996年100份标本中43份β-内酰胺酶试 验阳性，其余为阴性。1996年43株ppng株与57株非ppng株的12种抗生素mic值测定结果分析见表2。
讨 论
我们的实验结果表明：青霉素g等6种抗生素mic值1996年与1991年有显著性 差异(p＜0.05或p＜0.01)。其中以青霉素g和氟哌酸两年mic值变化最大 。青霉素g的mic值范围1991年为0.0625μg/ml～4.0μg/ml，1996年上升为0.25μg/ml～ 256.0μg/ml，mic50值上升63倍。氟哌酸的mic值范围1991年为0.0156μg/ml～1 .0μg/ml，1996年上升为0.125μg/ml～64.0μg/ml，mic50也上升63倍。其中有些抗生素虽然耐药菌株1996年比1991年增加不明显，但中敏菌株已明显增多且已接近耐药临界值。由此看来，随着这类抗生素的反复甚至不规则使用，耐药菌株还会大大增加。我们认为全面了解一种抗生素的耐药性变迁，应对比分析菌株在mic稀释度上的分布情况综合考虑，并且逐年进行监测。
我们还对1996年ppng株与non-ppng株mic值进行了分析比较。从表2可知，就青霉素g来说pp ng株比non-ppng株mic50值大127倍，mic90值大63倍。这与ison等 ［3］研究结果基本一致。ppng株在高度耐青霉素的同时，也存在对其它抗 生素的药物抗性。了解淋病流行过程中菌株对抗生素敏感性变迁情况，对正确选择用药、评价预防措施的效果以及制定防治对策均具有重要参考价值。
参考文献
1 叶顺章, 张木有. 性传播疾病实验诊断手册. 第一版. 广州: 广 东科技出版社, 1991.21-25.
2 叶顺章, 张木有. 性传播疾病实验诊断手册. 第一版. 广州: 广东科技出版社, 1 991.25-31.
3 ison ca, roope ns, dangor y, et al. antimicrobial susceptibilities and serotypi ng of neisseria gonorrhoeae in southern africa: influence of geo graphical source of infection. epidemiol infect, 1993,110∶297-305.
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