银屑病患者皮损组织中总RNA水平分析

2015-09-30 17:26:37

　　银屑病患者皮损组织中总rna水平分析

　　中华皮肤科杂志 1998年第2期第31卷论著摘要

　　作者：汪治中　郑茂荣　焦炳华　缪为民　孙君红

　　单位：200433 上海，第二军医大学附属长海医院皮肤科(汪治中　郑茂荣　孙君红)，微生物学教研室(焦炳华　缪为民)

　　生物细胞的表型及其变化均由严密调控的基因表达所决定，转录产物mrna是遗传信息从dna流向蛋白质的重要媒介。我们抽提了12例银屑病患者皮损组织中的总rna，发现其皮损组织中存在着十分活跃的转录过程。

　　一、研究对象

　　实验组为经临床及组织病理学检查证实为进行期寻常型银屑病且未经治疗的患者12例，均为男性，年龄22～41岁，病程14～90天。取皮部位为背部。取材方法：常规消毒局麻后，取受累皮肤损害中心处，未受累皮肤取自正常皮肤端，二者交界处皮肤弃之不用。标本为全层皮肤，取下后立即置液氮中保存备用。对照组12例，均为正常人，性别、年龄和取材部位均与实验组匹配。

　　二、材料和方法

　　组织自液氮中取出置于离心管中，立即在电子天平上称重，然后仍置液氮中备用。按文献［1］分次行总rna抽提和甲醛变性凝胶电泳，每3个标本一次完成(a、b、c组对应例数各1)。分别测a260和a280，a260为1时rna浓度为40μg/ml。

　　三、实验结果统计分析

　　实验结果采用方差分析和newman-keuls检验。

　　四、结果

　　(一)各组标本抽提的总rna量均值见附表，经方差分析，f处理=50.7223，p＜0.01，说明三组皮肤标本平均总rna值有非常显著性差异；f单位=1.0498，p＞0.05，说明就不同患者而言，相应部位的皮肤标本中平均总rna值无显著性差异。

　　(二)三组皮肤标本总rna量的总体均数存在差别，经newman-keuls检验，qac=12.2620，p＜0.01，说明皮损组与对照组的总rna量均数差异有显著性；qab=12.4079，p＜0.01，说明皮损组与非皮损组的总rna量均数之间亦存在显著性差异；qcb=0.1459，p＞0.05，说明非皮损组与对照组总rna均数之间差异无显著性。

　　(三)所有标本的总rna样品在甲醛变性凝胶电泳后均清楚显示18s和28s两条主带，a260／a280之比多在1.6～2.0之间。同等量组织标本的总rna电泳后，皮损组的荧光强度远高于另两组。

　　五、讨论

　　陈军等［2，3］在1997年发现cyclind和

　　附表　银屑病患者皮损与非皮损部皮肤组织总rna的含量(±s)

　　组　别病例总rna单位含量(μg/g)

　　银屑病皮损组(a)12343.3504±273.1365

　　银屑病非皮损组(b)1240.5195±10.4517

　　正常人皮肤组(c)1244.0806±13.1870

　　cdk４多肽及cycline蛋白质在银屑病皮损中的过表达现象［3，4］。蛋白质水平的代谢状况正成为银屑病的研究热点。我们的工作初步表明了在银屑病皮损组总rna均数显著高于另两组，其极大值约为正常对照组均数的12倍，其旺盛的转录活性与活跃的蛋白代谢相对应。皮损组总rna的95%单侧下限为70.2139μg/g，高于正常人对照组上限57.2676μg/g，说明皮损组的数值测定较为可靠。皮损组极大值与极小值差距较大，因而所表现的个体差异也较大。虽然有人发现银屑病未受累皮肤也有代谢的改变［4］，但我们的工作还不能在转录水平上提供证据，是否在非皮损组总rna中存在某单种rna成分的改变，尚需要进一步的工作。　　国家自然科学基金资助课题(39670674)

　　参　考　文　献

　　1 nickoloff bj, karabin gd, barker jnwn, et al. cellular localization of interleukin-8 and its inducer, tumor necrosis factor-alpha in psoriasis. am j pathol, 1991,138∶129-140.

　　2 陈军, 桑建利, 王永潮, 等. cyclind和cdk４ mrna及其多肽在银屑病皮损表皮中的过表达. 中华皮肤科杂志, 1997,30∶118-119.

　　3 陈军, 桑建利, 王永潮, 等. cycline和cdk２ mrna及蛋白质在银屑病皮损表皮中的表达. 中华皮肤科杂志, 1997,30∶119-120.

　　4 刘镇修, 宗志宏, 李炎夏, 等. 银屑病患者皮损与非皮损区皮肤中蛋白激酶c活性. 中华皮肤科杂志, 1997,30∶111-112.

　　(收稿：1997-08-27　　修回：1997-12-16)